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常見問題解答

霉菌計數如何保證結果準確?


                         
霉菌菌落由孢子和菌絲組成,相當擴散,在直徑9cm的平皿里,菌落數稍多就相互交叉重疊,影響計數,但數量太少又會產生較大的誤差,因此選擇適當的稀釋度計數是保證結果準確的關鍵環節之一。
我們對這方面作了一些觀察研究,首先是將實驗菌株的斜面培養物制成含有約106個/ml的孢子懸液,并用血球計數器在顯微鏡下準確計數,然后將孢子懸液作10-1~10-6倍稀釋,吸取不同稀釋度的稀釋液接種于PDA,25℃培養5天后計數。30種常見霉菌的兩種不同計數方法所得結果比較顯示,大部分菌株每平板含有10~50個菌落的稀釋度時的計數與顯微鏡計數結果最接近;有近一半的菌株,每個平板含50~100個菌落已較難計數,而大部分菌株,超過100個/平皿或小于10個/平皿的計數結果就與顯微計數結果存在較大差別,因此,應盡量選擇10~50個/平皿的稀釋度進行霉菌計數。
而對上述提及的菌絲很豐富、菌落特別擴散的毛霉、根霉、犁頭霉等菌株,則應在更少的范圍內計數(30個/平皿以內)。為控制霉菌的生長速度和菌落的生長范圍,可在培養基中添加少量抗生素,如氯霉素(50~100mg/L),金霉素(20~100mg/L),慶大霉(50mg/L),土霉素(100mg/L)等。
其它問題
  • 剩余的培養基再次使用是否重新滅菌?
  • 培養基配置有哪些注意事項?
  • 涂抹樣品的檢測,應當怎樣計數和報告?
  • 同一個稀釋度,菌落總數一個在計數范圍,一個不在計數范圍,怎么計?
  • 菌落總數的測定,只做一個稀釋度行嗎?
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